Hei acolo! În calitate de furnizor de tuburi PCR, de multe ori sunt întrebat despre cele mai bune modalități de a curăța tuburile PCR fără a lăsa reziduuri. Este un pas crucial în menținerea exactității și fiabilității experimentelor PCR. Reziduurile pot interfera cu reacția, ceea ce duce la rezultate inexacte. Așadar, haideți să ne aruncăm în câteva sfaturi și metode practice care vă pot ajuta să obțineți reziduuri - tuburi PCR gratuite.
De ce să curățați în mod corespunzător tuburile PCR?
Înainte de a intra în metodele de curățare, să înțelegem de ce este atât de important să curățăm bine tuburile PCR. PCR este o tehnică extrem de sensibilă. Chiar și cea mai mică urmă de contaminanți precum ADN -ul, proteinele sau substanțele chimice poate afecta procesul de amplificare. De exemplu, dacă există un ADN rămas dintr -un experiment anterior din tub, acesta poate acționa ca un șablon neintenționat în timpul noii reacții PCR, ceea ce duce la falsuri pozitive. De asemenea, reziduurile chimice de la detergenți sau dezinfectanți pot inhiba enzimele utilizate în PCR, prevenind amplificarea corectă.
Pre - Considerații de curățare
În primul rând, trebuie să gestionați cu atenție tuburile PCR folosite. Purtați întotdeauna mănuși pentru a preveni introducerea propriului ADN sau alți contaminanți. Odată ce reacția PCR este terminată, este o idee bună să etichetați în mod clar tuburile dacă aveți de -a face cu mai multe probe. Acest lucru ajută la urmărirea procesului de curățare și vă asigură că nu amestecați tuburile.
Clătirea inițială
Primul pas în curățarea tuburilor PCR este o clătire simplă. Începeți prin umplerea unui recipient cu apă deionizată. Puteți utiliza un pahar sau un bazin mare de spălare. Puneți ușor tuburile PCR folosite în apă. Lasă -le să se înmoaie câteva minute. Această clătire inițială ajută la eliminarea resturilor libere sau a componentelor de reacție din tuburi. După înmuiere, luați fiecare tub și învârtiți -l ușor în apă pentru a disloca orice particule rămase. Apoi, turnați apa din tuburi. Puteți face acest lucru ținând tubul într -un unghi și lăsând apa să se scurgă încet.
Curățare detergent
După clătirea inițială, este timpul să folosiți un detergent ușor. Alegeți un detergent care nu are enzime, ADN și alți contaminanți care ar putea interfera cu PCR. Puteți găsi detergenți speciali de laborator - care sunt concepuți pentru curățarea echipamentelor delicate precum tuburile PCR.
Umpleți un recipient cu o soluție de detergent diluat. Raportul de diluare recomandat este de obicei prevăzut pe ambalajul de detergent. Puneți tuburile PCR în soluția de detergent și lăsați -le să se înmoaie cel puțin 15 - 20 minute. Acest timp de înmuiere permite detergentului să descompună reziduurile încăpățânate. În timp ce tuburile se înmoaie, puteți agita ușor soluția prin învârtirea recipientului la fiecare câteva minute.
După perioada de înmuiere, luați fiecare tub și folosiți o perie moale - perie (o perie mică, curată, poate funcționa bine) pentru a freca ușor interiorul tubului. Acordați o atenție deosebită fundului și părților laterale ale tubului în care reziduurile sunt probabil să se acumuleze. Aveți grijă să nu zgâriați tubul, deoarece zgârieturile pot afecta și reacția PCR.
După ce ați spălat toate tuburile, clătiți -le bine cu apă deionizată. Puteți face acest lucru ținând tubul sub un flux blând de apă sau așezând tuburile înapoi într -un recipient umplut cu apă deionizată proaspătă și clătindu -le de mai multe ori. Asigurați -vă că eliminați toate urmele detergentului. Detergentul rezidual poate fi la fel de problematic ca și alți contaminanți din PCR.
Tratament acid
În unele cazuri, în special atunci când aveți de -a face cu reziduuri deosebit de încăpățânate, un tratament acid poate fi eficient. Poate fi utilizat acid clorhidric (HCl) sau acid azotic (HNO₃), dar trebuie să fie gestionate cu îngrijire extremă. Acești acizi sunt corozivi și pot provoca vătămări grave dacă nu sunt folosiți corect.
Pregătiți o soluție de acid diluat într -o capotă de fum. Concentrația soluției de acid trebuie să fie foarte scăzută, de obicei în jur de 1 - 2%. Puneți tuburile PCR în soluția de acid și lăsați -le să se înmoaie pentru o perioadă scurtă, de obicei nu mai mult de 5 - 10 minute. Acidul ajută la dizolvarea reziduurilor anorganice.
După tratamentul cu acid, clătiți imediat tuburile bine cu apă deionizată. Trebuie să le clătiți de mai multe ori pentru a vă asigura că tot acidul este îndepărtat. Orice acid rămas poate deteriora tuburile PCR și, de asemenea, afectează reacția PCR.
Alcool
O clătire a alcoolului este un mare pas final în procesul de curățare. Alcoolul izopropilic (IPA) este frecvent utilizat. Umpleți un recipient cu 70 - 80% alcool izopropilic. Puneți tuburile PCR curățate în alcool și lăsați -le să se înmoaie câteva minute. Alcoolul ajută la eliminarea oricărei ape rămase și, de asemenea, acționează ca un dezinfectant.
După înmuiere, îndepărtați tuburile din alcool și lăsați -le să se aerisească într -un mediu curat. Le puteți așeza pe un prosop de hârtie curat sau pe un suport. Asigurați -vă că tuburile sunt complet uscate înainte de a le folosi din nou. Umiditatea poate introduce, de asemenea, contaminanți sau poate afecta reacția PCR.
Depozitarea tuburilor PCR curățate
Odată ce tuburile PCR sunt curate și uscate, este important să le păstrați corect. Depozitați -le într -un recipient curat, cu praf - fără. Puteți utiliza pungi de plastic sau rafturi speciale pentru tuburi concepute pentru tuburile PCR. Etichetați în mod clar recipientul pentru a indica faptul că tuburile sunt curate și gata de utilizare.
Ofertele noastre de tuburi PCR
La compania noastră, oferim o gamă largă de tuburi PCR de înaltă calitate, inclusiv0,2 ml tuburi PCR,0,1 ml tuburi PCR, și8 tuburi PCR cu benzi. Aceste tuburi sunt fabricate din materiale de înaltă calitate, care sunt concepute pentru a rezista rigorilor experimentelor PCR. Au o conductivitate termică excelentă și proprietăți de legare scăzute, care ajută la asigurarea unor rezultate precise și fiabile.
Dacă sunteți pe piață pentru tuburi PCR sau aveți întrebări cu privire la curățarea sau utilizarea acestora, nu ezitați să ajungeți. Suntem aici pentru a vă ajuta cu toate nevoile dvs. de tub PCR. Indiferent dacă sunteți un mic laborator de cercetare sau o mare companie farmaceutică, putem oferi produse și sprijin potrivit pentru experimentele dvs.
Concluzie
Curățarea tuburilor PCR fără a părăsi reziduurile este un proces cu mai multe etape care necesită atenție la detalii. Urmând pașii prezentate mai sus, vă puteți asigura că tuburile dvs. PCR sunt curate și gata de utilizare în următorul dvs. experiment. Nu uitați, curățarea corectă este esențială pentru succesul reacțiilor dvs. PCR. Dacă aveți alte întrebări sau aveți nevoie de mai multe informații, nu ezitați să ne contactați. Suntem întotdeauna fericiți să vă ajutăm.
Referințe
- Sambrook, J., & Russell, DW (2001). Clonarea moleculară: un manual de laborator (ediția a 3 -a). Presă de laborator de la Cold Spring Harbour.
- Ausubel, FM, Brent, R., Kingston, RE, Moore, DD, Seidman, JG, Smith, JA, & Struhl, K. (Eds.). (1995). Protocoale curente în biologia moleculară. John Wiley & Sons.